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牛血清的“科研實驗”:但你可能用錯了?

更新時間:2025-07-28    點擊次數(shù):1859

  牛血清那些你不知道的事

  血清的用途

  科研實驗中,細胞的體外培養(yǎng)一直是一個重要環(huán)節(jié)。細胞要養(yǎng)好,就要用好血清,如特級胎牛血清,它適合各種細胞培養(yǎng),尤其適合難養(yǎng)細胞。

  牛血清是一種成分復雜的混合物,其大部分成分已為人所知,但還有一部分仍不清楚,而且血清的組成及含量通常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而存在差異。

  血清的主要成分

  蛋白質(zhì)類

  包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促進細胞附著)、轉(zhuǎn)鐵蛋白(能結合鐵離子,減少其毒性和被細胞利用)、纖維粘連素(促進細胞附著生長)等;

  多肽類

  主要是一些促進細胞生長和分裂的生長因子,最主要的生長因子是血小板生長因子,還有成纖維細胞生長因子、表皮細胞生長因子、神經(jīng)細胞生長因子等,雖然在血清中含量很少,但對細胞的生長和分裂也起著重要作用;

  激素類

  激素對細胞的作用是多方面的。包括:促進細胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細胞分裂有關;類胰島素生長因子:能與細胞表達的胰島素受體結合,從而有胰島素同樣的作用:促生長激素:促進細胞增殖的效應;血清中含有微量該成分,它可能具有促細胞貼附和增殖作用。但有人證明,血清中的氫化可的松,在細胞密度較高時可能有抑制細胞生長和誘導細胞發(fā)生分化的作用。

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  其他成分

  如氨基酸、葡萄糖、微量元素等。在合成培養(yǎng)基中這些成分的作用并不明顯,與蛋白相結合的微量元素對細胞生長起促進作用。

  使用注意事項

  血清的保存

  在-15℃以下血清的有效期為5年,4℃可保存數(shù)周,不宜室溫保存,不宜反復凍融。配制成培養(yǎng)基后應在四周內(nèi)用完,一瓶血清如無法一次用完應無菌分裝成恰當數(shù)量并冷凍保存。

  血清中的絮狀沉淀物

  血清是多種蛋白質(zhì)的混合物,在凍融過程中會出現(xiàn)絮狀沉淀物,主要原因是由于血清中脂蛋白和纖維蛋白變性所造成。但并不影響血清本身的質(zhì)量和使用。如需去除可先400g離心取上清液配制成培養(yǎng)基再過濾即可使用。

  血清的解凍

  合理的解凍方式可以更好的保護血清質(zhì)量并可以在上減少絮狀沉淀物的產(chǎn)生。血清從低溫冰箱中取出后,經(jīng)4℃冰箱、室溫、37℃水浴逐步規(guī)則搖晃均勻融解,直至融解后再使用。

  血清的熱滅活

  將血清嚴格56℃水浴均勻加溫30分鐘可以滅活血清中的補體系統(tǒng)。是不是所有用途的血清都需要熱滅活呢?對大多數(shù)細胞來說是不需要的。激活的補體能參與溶解細胞,刺激光滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。因此在免疫學研究,培養(yǎng)ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌肉細胞時,建議使用熱滅活血清,在正常情況下加熱處理對血清的促細胞生長效應無明顯促進作用,甚至會因為加熱處理影響血清的質(zhì)量。

  血清中的“小黑點”現(xiàn)象

  血清在經(jīng)過一段時間的低溫凍存再融解后,在正常情況下會出現(xiàn)絮狀蛋白沉淀。但往往有用戶反應血清中有“小黑點”現(xiàn)象,認為是微生物污染。實驗發(fā)現(xiàn)血清在37℃環(huán)境放置時間過長或經(jīng)過加熱滅活處理,血清中的沉淀物往往會呈增多趨勢,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,讓使用者誤以為是血清遭受微生物污染并在分裂增殖。因此如無必要,可以不進行熱滅活處理并保證血清的低溫保存。

  注:以上資料僅供參考,不同品牌產(chǎn)品可能存在設計差異,操作前建議參考說明書‌。

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