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以下是關(guān)于植物海藻糖-6-磷酸(T6P)ELISA試劑盒說明書的核心內(nèi)容整理

更新時間:2025-05-15    點擊次數(shù):294

  以下是關(guān)于?植物海藻糖-6-磷酸(T6P)ELISA試劑盒說明書?的核心內(nèi)容整理:

  BS-8050 植物海藻糖-6-磷酸(T6P)ELISA試劑盒 天津本生

  實驗原理?

  采用雙抗體夾心法(或一步夾心法)檢測T6P濃度:

  包被抗體?:微孔板預(yù)包被T6P特異性抗體。

  反應(yīng)體系?:依次加入樣本、標(biāo)準(zhǔn)品和HRP標(biāo)記檢測抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。

  顯色與檢測?:TMB底物在HRP催化下顯色(藍(lán)色→黃色),450nm波長測定OD值,濃度與吸光度正相關(guān)。

  試劑盒組成?

  組分 96孔配置(示例) 備注

  微孔酶標(biāo)板 12孔×8條 預(yù)包被抗體

  標(biāo)準(zhǔn)品 0.3mL×6管 濃度梯度:0-80 μg/L或0-12 ng/mL

  HRP檢測抗體 6mL(或10mL) 需避光保存

  TMB底物(A/B) 各6mL 現(xiàn)配現(xiàn)用

  終止液 6mL(2M硫酸) 顯色終止

  20×洗滌緩沖液 25mL 使用前1:20稀釋

  樣本處理要求?

  樣本類型?:植物組織勻漿、細(xì)胞上清液等,避免含疊氮鈉(HRP抑制劑)。

  預(yù)處理?:1000×g離心20分鐘取上清,分裝后-20℃保存,避免反復(fù)凍融。

  操作步驟?

  平衡試劑?:使用前室溫平衡20分鐘,預(yù)冷組分需溶解。

  加樣與孵育?:

  標(biāo)準(zhǔn)品孔加入梯度濃度標(biāo)準(zhǔn)品,樣本孔加入待測液(建議復(fù)孔)。

  37℃孵育60分鐘,洗板5次(手工或自動洗板機(jī))。

  顯色與終止?:

  每孔加入TMB底物,避光反應(yīng)15分鐘。

  加入終止液后15分鐘內(nèi)測定OD450值。

  注意事項?

  質(zhì)量控制?:S0標(biāo)準(zhǔn)品作為陰性對照,樣本濃度需乘以稀釋倍數(shù)。

  保存條件?:未使用板條需密封保存于4℃,試劑盒有效期通常為6個月(2-8℃)。

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